输血科

ABO亚型的检测

时间:2019-02-24

ABO亚型的检测

 

什么是ABO亚型?ABO亚型的种类和血清学特点是什么?怎样才能发现ABO亚型?ABO亚型怎样去检测?

      如果您对上述问题有疑惑,推荐您精读上海市血液中心向东教授的这篇发表于2010年中国输血杂志上的经典文献:《ABO亚型的检测》。读完之后,您将会对ABO亚型及其相关检测有一个全面和系统的了解。

     《ABO亚型的检测》全文如下:

 

一、ABO亚型概况

 

1.1 ABO亚型的定义

       ABO亚型是指在常见的人类A、B、AB、O 4种血型之下进一步细分的ABO血型, 这些亚型必须具有遗传基础,并且有明确的血清学特点。因年龄、疾病、妊娠等不可遗传的因素造成的血型改变不能认为是亚型;同样,那些虽然有基因改变,但并不影响血清学特点的ABO血型也不能称为亚型。

1.2 ABO亚型的分布

       最常见的ABO亚型存在于A型人群中, A型个体大多数属于A1型,少数属于Aint、A2 型。A2亚型在白人和黑人中的比例相当高, 约占欧洲A型个体的22% ,占南非A型黑人的43%, 在亚洲人群中A2型相对较少, 如中国上海地区A型个体中A2 约占0.5%,而日本为0.1%,韩国仅有0.02%;早期国内A2型个体检出比例较高,可能是受到Aint型的干扰;Aint可以看做是A1和A2型的过渡型,数量多于A2型,但两者在血清学上十分接近,甚至难以严格区分。在亚洲地区人群中A2B亚型相对A2亚型检出比例明显偏高,中国上海地区AB型个体中A2B约占4%, 日本为1.6%, 韩国为0.6%。A2B和A2型比较,表现型频率同比高出9-30倍。除去A1、Aint、A2 型之外, 其他ABO亚型相当罕见, 根据现有数据, 在我国约为1.5/1万或略多, 而且B亚型的数量明显多于A亚型。

       以上亚型不包括孟买和类孟买型, 孟买和类孟买型是H基因变异的结果, 但考虑到其造成的ABO血型的异常表现,因此可以算作广义上的ABO亚型。类孟买型在我国不同区域人群中的分布比例约为1/8 000~1/16 000。但常规ABO定型中,由于不使用抗-H,通常不会检出类孟买型。

1.3 ABO亚型的种类及血清学特点

       见诸报道的ABO亚型有几十种之多,除了最常见的A2 、Aint之外, A亚型还有A3、Ax、Am、Aend、Ael、Afinn、Abantu和Ay等;B亚型有B3 、Bx、Bm、Bend和Bel等, 这些ABO亚型也可以作为AB型的形式出现(例如“ABx”或者“ AxB”);除此之外还有顺式AB型, 包括CisAB和B(A);O亚型有H抗原表达减弱的Om型。再加上广义的ABO亚型“孟买”和“类孟买”型, 形成了错综复杂的ABO亚型大家族。

        我们知道ABO亚型的基础是基因改变,而现在发现的ABO亚型基因种类远远多于根据血清学划分出的类型, 目前发现的形成亚型的基因单体型超过100种(Genbank中登记的单倍型超过200种, 但其中有重复和无血清学改变的单体型), 也就是说每1种血清学类别中都可能包含了许多种不同的基因类型, 而不同的基因型之间往往可产生细微的血清学表现差异, 这使得用血清学方法严格划分不同ABO亚型变得十分困难;而且血清学表现存在个体差异, 相同的基因型可产生略有不同的血清学结果, 另外血清学检测也容易受主客观因素的影响, 因此单纯用血清学方法确定ABO亚型无法做到十分精确。在实际操作中, 虽然我们可以将大部分ABO亚型用现有的分类法分类,但也常常遇到和任何现现有亚型血清学特点均不能完全相符的情况, 在没有确切的证据证明这些表现可以定义为1种新的ABO亚型之前,我们可以根据其主要的血清学特点, 将其纳入现有的亚型框架,或者使用一些文献提供的“Aw”和“Bw”的表达方式来淡化不同ABO亚型的血清学特点。总之,在日常做ABO亚型检测时,通过合理的定义和正确的检测方法为ABO亚型分型,仍不失为一种十分有用表达方法。这样做可以使我们大致了解该1份血标本表达的ABO抗原强度,是否存在或容易产生不规则抗-A、抗-B及抗-H, 是否存在相应血型物质等线索,对其临床意义、遗传特性的判断等也能提供很有意义的信息。

1 中国人群常见ABO亚型及获得性血型变异的血清学特点

(图片:中国输血杂志2010年8月第23卷第8期577-579)

 

二、ABO亚型的血清学检测方法和技术

 

2.1 发现ABO亚型——正反定型不符

       一般通过正反定型不符可发现ABO亚型。许多亚型单从“反应”与“不反应”的角度看, 正反定型是相符的, 只是某些反应的强度较弱, 因此使用更严格的判定方法可以更多地检出ABO亚型,例如用试管法检测ABO血型时, 作为成人被检者, 如果没有血液系统的疾病, 其正定型在试管法中应该有“4+”强度的凝集, 否则极有可能是ABO亚型;对于反定型, 如果凝集强度<2 +, 甚至仅存在冷反应性不规则抗-a或抗-b, 这也提示有可能存在亚型。只是通过反定型减弱预判亚型的可靠性远低于正定型减弱。

2.2正定型的凝集强度与凝集状态

        应用血清学对ABO亚型进行分类时, 正定型的凝集强度和“凝集的状态”是很重要的信息, 例如A2亚型与合格的人源抗-A试剂反应,可以达到4+, 而Ax形成的凝集一般≤2+, 至于“凝集的状态”主要是指正常凝集和“混合视野凝集”的区别。所谓“混合视野凝集”是指部分细胞凝集,部分细胞不凝集的状态,例如用O型和A型红细胞混合后加入抗-A,并在试管中离心, 可以模拟出混合视野的凝集状态:如果混合视野凝集中凝集的红细胞≥50%,通常判定为A3或B3型,

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